低聚果糖在體外對大腸桿菌、嗜酸乳桿菌生長曲線的影響（二）
1.4.5大腸桿菌OD值測定
取LB肉湯培養基200μL于96孔板內，接種稀釋的10??倍大腸桿菌菌液100μL，每組3個平行，置36±1℃溫箱內培養24h，每隔3個小時630nm測定吸光度，連續測定24h并繪制生長曲線。
1.4.6嗜酸乳桿菌OD值測定
分別取MRS肉湯培養基200μL于96孔板內，接種稀釋的10??倍乳酸桿菌菌液100μL，每組3個平行，置36±1℃溫箱內厭氧培養48h，每隔3個小時測定630nm的吸光度，連續測定48小時并繪制生長曲線。
1.5試驗數據處理與統計
試驗中所有數據采用SPSS20.0軟件中單因素方差分析(ONE-WAY ANOVA)進行統計，P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著，均采用Duncan法進行多重比較。
2結果
2.1低聚果糖對大腸桿菌的影響
低聚果糖對大腸桿菌活菌數的影響:活菌計數試驗結果顯示，大腸桿菌在20g/L、30g/L、40g/L濃度的低聚果糖作用下，對應的菌落數分別為5.10×10?cfu/mL、4.17×10?cfu/mL、5.53×10?cfu/mL，對照組菌落數為6.53×10?cfu/mL，其中低聚果糖30g/L組大腸桿菌活菌數顯著(P<0.05)且低于對照組，其余兩組活菌數雖低于對照組但無差異性(P>0.05)，具體變化如圖1所示。
低聚果糖對大腸桿菌OD值的影響:通過測量大腸桿菌生長曲線，如圖2所示，大腸桿菌在轉接后的6小時內生長速度比較緩慢，在6~9h內生長速度較快，9h后菌體濃度開始趨于穩定，可知大腸桿菌可以利用低聚果糖。圖2中，20g/L低聚果糖組在0~24h增殖速度相比對照組、30g/L、40g/L較快;18h以后對照組大腸桿菌濃度比其他二組高，且18h開始其菌體濃度趨于穩定，此時大腸桿菌在630nm的OD值分別為:0.89、0.70、0.78、0.79，其中30g/L低聚果糖組大腸桿菌菌體數量最低。綜上可知，30g/L濃度的低聚果糖可使大腸桿菌的增值速度降低。
2.2低聚果糖對嗜酸乳桿菌的影響
低聚果糖對嗜酸乳桿菌活菌數的影響:活菌計數試驗結果顯示，乳酸桿菌在20g/L、30g/L、40g/L濃度的低聚果糖作用下，對應的活菌數分別為3.57×10?cfu/mL、3.93×10?cfu/mL、3.40×10?cfu/mL，對照組菌落數為3.27×10?cfu/mL，其中30g/L低聚果糖組較其他組增值效果明顯(P>0.05);20g/L、40g/L與對照組嗜酸乳桿菌菌落數相比，雖有增長，但無顯著差異性(P>0.05)。說明添加一定量的低聚果糖對嗜酸乳桿菌均起增值作用，其中30g/L添加量效果較好。具體變化如圖3所示。
低聚果糖對嗜酸乳桿菌OD值的影響:通過測量嗜酸乳桿菌生長曲線，如圖4所示，在轉接后的15h內乳酸菌的生長比較緩慢，在15~30h內乳酸菌生長速度較快，在36h開始菌體濃度開始趨于穩定，此時嗜酸乳桿菌在630nm的OD值分別為:1.18、1.20、0.98、1.22。圖4中，在24h時40g/L濃度組嗜酸乳桿菌的增殖速度開始降低;綜上可知，40g/L濃度低聚果糖使嗜酸乳桿菌的增值速度降低，添加低聚果糖20g/L、30g/L與對照組接近無顯著差異。
3結論與分析
腸道菌群對腸道有著重要的保護作用，正常比例的腸道菌群可以有效的抵御外來病原的入侵，維持腸道內環境的穩定和微生態平衡。大腸桿菌是人及各種動物腸道中重要的正常寄生菌，嗜酸乳桿菌是微生態平衡中起重要作用的菌種之一，體外實驗采用活菌計數法，以活菌數量計數、活菌生長曲線為判斷標準，對比了兩菌種的生長情況，可以清晰地看出低聚果糖對大腸桿菌和乳酸桿菌這兩種重要的腸道菌的生長影響。
在以低聚果糖為唯一碳源的麥康凱培養基和MRS培養基上培養大腸桿菌和乳酸桿菌，結果顯示，低聚果糖在體外可以抑制大腸桿菌的生長，促進嗜酸乳桿菌的生長，適宜濃度為30g/L，本實驗結果與Blaut等人對功能性低聚糖能夠抑制有害菌促進有益菌生長的研究結果一致，為動物臨床試驗以及推廣提供科學依據。
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