oCelloscope微生物生長動態(tài)監(jiān)測系統(tǒng)監(jiān)測禾谷鐮孢菌生長情況
近年來,禾谷鐮孢菌感染引起的赤霉病在世界范圍內(nèi)頻繁爆發(fā),造成嚴(yán)重的產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)損失,該病原菌還會產(chǎn)生大量真菌毒素污染糧食,給人畜健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。
禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum)是引起許多農(nóng)作物嚴(yán)重病害,包括小麥赤霉病、冠腐病和幼苗枯萎病,以及玉米赤霉莖腐病和穗腐病的主要病原之一。植物病原真菌禾谷鐮孢菌在侵染小麥期間,特異誘導(dǎo)次生代謝基因簇fg3_54表達(dá),合成線性非核糖體八肽-鐮孢菌素A(fusaoctaxin A),賦予鐮孢菌菌絲在小麥組織內(nèi)從一個細(xì)胞穿壁入侵到旁鄰細(xì)胞擴(kuò)展的能力。
由于禾谷鐮孢菌侵染作物的毒力因子、分子致病機(jī)制尚不清楚,對于禾谷鐮孢菌的防治手段十分有限,主要集中在化學(xué)防治,還沒有完全有效的生物防治方法可供使用。
研究內(nèi)容:
鐮孢菌素A的生物學(xué)活性觀察:用oCelloscope微生物生長動態(tài)監(jiān)測系統(tǒng)來實時監(jiān)測禾谷鐮孢菌和腐皮鐮刀菌,在暴露于0-100μM濃度化學(xué)合成的鐮孢菌素A時的生長情況:在96孔板中加入200μL無菌過濾YPG培養(yǎng)基、5000個禾谷鐮孢菌孢子和0μM、12.5μM、25μM、50μM、100μM的鐮孢菌素A,在25℃條件下,20分鐘間隔,180次重復(fù),監(jiān)測生長(見下圖)。
圖八肽鐮孢菌素A、五肽鐮孢菌素A、三肽鐮孢菌素A對鐮孢菌沒有表型效應(yīng)。所有實驗重復(fù)3次,基準(zhǔn)尺200μm。a、e:0.5%乙醇對照;b、f:100μM八肽鐮孢菌素A;c、g:100μM五肽鐮孢菌素A;d、h:100μM三肽鐮孢菌素A。
結(jié)論
八肽鐮孢菌素A是由禾谷鐮孢菌中的兩個真菌非核糖體肽合成酶串聯(lián)合成的。在具有肽酶活性的簇特異性ABC轉(zhuǎn)運蛋白的轉(zhuǎn)運過程中,八肽鐮刀菌肽A被ABC轉(zhuǎn)運蛋白切割為三肽鐮孢菌素A和五肽鐮孢菌素A。
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