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納豆芽胞桿菌生理生化鑒定、生長曲線及產(chǎn)納豆激酶的酶活力

[目的]篩選并鑒定納豆芽胞桿菌。[方法]篩選芽胞桿菌,顯微鏡觀察其菌落形態(tài),生理生化鑒定,測定其生長曲線及產(chǎn)納豆激酶的酶活力。


[結(jié)果]篩選到一株產(chǎn)納豆激酶的納豆芽胞桿菌ZD023。該菌最高酶活力可以達263.38 IU/ml。


[結(jié)論]篩選到一株產(chǎn)納豆激酶的納豆芽胞桿菌ZD023,為下一步開發(fā)成具有溶栓功能的食品或藥品奠定基礎(chǔ)。


血栓疾病是一類嚴重危害人類健康和生命的疾病,包括心血栓、腦血栓、肺栓塞和末梢動靜脈血栓等常見疾病[1]。隨著我國人們生活水平的提高,膳食中高脂肪、高蛋白被過量攝取,血栓性疾病已超過癌癥和糖尿病成為第一大健康殺手,每年約有350萬人死于心血管病,占總死亡原因的41%[1]。因此,研究開發(fā)治療血栓性疾病的藥物一直是醫(yī)學(xué)上的熱點。


1987年須見洋行[2]博士首先發(fā)現(xiàn)了溶解血栓的生物武器——納豆激酶(Nattokinase,NK)。它是由納豆芽胞桿菌(Bacillus natto)產(chǎn)生的一種具有纖溶活性的中性絲氨酸蛋白酶。它可用于治療和預(yù)防血栓病,通過口服直接溶解血栓,被認為是一種非常有前途的溶血栓和抗血栓藥物。由于納豆激酶的優(yōu)點,近年圍繞納豆激酶生產(chǎn)菌株篩選的工作方興未艾。該研究從湖北武漢市土壤中篩選到一株產(chǎn)納豆激酶的納豆芽胞桿菌ZD023,研究了菌落形態(tài),進行生理生化鑒定及16S rRNA基因比對,采用纖維蛋白平板法測定了其產(chǎn)納豆激酶的酶活力,為下一步開發(fā)成具有溶栓功能的食品或者藥品奠定基礎(chǔ)。


對該菌株進行菌落形態(tài)、細胞形態(tài)觀察。通過生理生化分析及16S rRNA基因分析,初步認定該菌為納豆芽胞桿菌;同時,測定了30℃LB液體培養(yǎng)基中生長曲線以及發(fā)酵時間與產(chǎn)納豆激酶的關(guān)系,該菌最高酶活力可以達263.38 IU/ml。這為下一步研究其液體發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶進行溶栓藥物的研究且開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的生物溶栓藥物奠定基礎(chǔ)。


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